油茶籽油，精辟又名山茶油、对于茶油，油茶影响其脂肪酸组成与“液体黄金”橄榄油尤为相似，籽油其还富含角鲨烯、萜类甾醇等三萜类化合物。化合三萜类化合物对于人体的物含营养保健起侧紧张的熏染，如具备飞腾血清胆固醇水平，精辟提防心脏病及抗炎、对于抗癌等熏染。油茶影响当初，籽油油茶籽油三萜类化合物钻研大多会集在菜油甾醇、萜类谷甾醇、化合豆甾醇等多少种罕有甾醇，物含而对于其余三萜类化合物并未深入钻研。精辟为关注油茶籽油精辟加工历程中三萜类化合物含质变更，本钻研以正己烷为洗脱剂，接管中性氧化铝柱层析提取分说差距精辟工序油茶籽油中三萜类化合物，并运用 GC － MS 测定差距精辟工序的油茶籽油中三萜类化合物含量，钻研精辟历程对于三萜类化合物含量的影响，对于周全意见油茶籽油的营养具备紧张意思，并为后续睁开油茶籽油偏激精辟提供数据反对于。

1 质料与措施

1． 1 试验质料

1． 1． 1 质料与试剂

油茶籽浸出毛油及其脱酸油、脱色油、脱臭油、废品油，各 6 批次，由江西齐云山油茶科技有限公司提供。角鲨烯、胆甾烷醇、菜籽甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、 β － 谷甾醇、β － 香树脂醇、羽扇豆醇、环阿屯醇、熊果醇、桦木醇、无水嘧啶，美国 Sigma 公司; 羊毛甾醇，美 国 Avanti 公司; 中性氧化铝( 薄层用，FCP200 ～ 300 目) ; 氢氧化钾、无水乙醇，合成纯; 正己烷，色谱纯，美 国 Honeywell 公司; 0．22 μm 滤膜，日本 Shimadzu 公 司; 99∶ 1 双三甲基硅基三氟乙酰胺 － 三甲基氯硅烷( 99∶ 1 BSTFA －TMCS) ，美国 TCI 公司。 

1． 1． 2 仪器与配置装备部署

7890B + 7000D 气相色谱 － 三重四级杆串接质谱联用仪，美国安捷伦公司; QUINTIX124 － 1CN 电
子合终日平( 精度≤0． 1 mg) ，德国赛多利斯公司; HH － 6 电热恒温水浴锅，上海博讯实业有限公司; Vortex Wizard 涡旋仪，意大利 VELP 公司; N － EVAP氮吹仪，美国 Organomation 公司; Ｒ － 100 旋转蒸发器，瑞士 Buchi 公司; 层析柱、冷凝回流管、圆底烧瓶、玻璃试管，四川蜀玻有限公司。 

1． 2 试验措施

1． 2． 1 尺度曲线的绘制

用丙酮分说配制 1 mg /mL 角鲨烯、菜籽甾醇、菜油甾醇、胆甾烷醇、豆甾醇、β － 谷甾醇、β － 香树
脂醇、环阿屯醇、羽扇豆醇、熊果醇、羊毛甾醇、桦木醇母液。样品测定时，凭证油茶籽油中实际三萜类
化合物浓度，在各三萜类化合物线性规模内将母液配制因素辩含有 0． 二、0． 五、一、二、五、10 μg /mL 豆甾醇、羽扇豆醇、桦木醇、熊果醇、菜籽甾醇、菜油甾醇，二、五、十、20、50、100 μg /mL 角 鲨 烯、β － 谷 甾醇、羊毛甾醇，十、2五、50、100、250、500 μg /mL 环阿屯醇、β － 香树脂醇 6 个梯度的差距品质浓度混标，混 标 中 加 入 100 μL 内 标 ( 1 mg /mL 胆 甾 烷醇) 。氮 吹 后 加 入 100 μL 硅 烷 化 试 剂 ( 99 ∶ 1 BSTFA － TMCS 以及等体积无水嘧啶) 衍生试剂，室温部署 15 min，退出 1 500 μL 正己烷稀释，过 0． 22 μm 有机滤膜，进气相色谱 － 质谱检测。以目的化合物资量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制尺度曲线。 

1． 2． 2 GC － MS 条件

1． 2． 2． 1 GC 条件

HP － 5MS 色 谱 柱 ( 30 m × 0． 25 妹妹 × 0． 25 μm) ; 载气为氦气，流速 0． 95 mL /min; 进样口温度320 ℃，进样量 1 μL，不分流进样; 柱升温挨次为初始温度 180 ℃，坚持 1 min，以 4 ℃ /min 升到 300 ℃，坚持 25 min; 溶剂延迟光阴 20 min。 1． 2． 2． 2 MS 条件电子轰击离子源，电子能量 70 eV，传输线温度300 ℃，离子 源 温 度 250 ℃，质 量 扫 描 范 围 ( m /z) 50 ～ 650。每一种目的化合物定性、定量离子见表 1。

1． 2． 3 中性氧化铝柱的制备

参照 GB /T 25223—2010《动植物油脂 甾醇组成以及甾醇总量的测定 气相色谱法》并稍作改善。在 20 mL 乙醇中退出 10 g 中性氧化铝混合，并将混合液倒入层析柱中，使氧化铝沉降并敲打至无裂痕，使
用前掀开活塞使乙醇液面抵达氧化铝顶层时封锁，备用。 

1． 2． 4 样品中三萜类化合物的提取及含量测定

精确称取每一批次油茶籽油样品( 0． 50 ± 0． 01) g， 3 个一再，退出 100 μL 内标物( 1 mg /mL 胆甾烷醇) 以及 2% 的氢氧化钾 － 乙醇溶液，混匀，75 ℃ 上水浴回流 1 h 后冷却至室温，取 5 mL 皂化液至中性氧化铝柱，先用 5 mL 乙醇洗涤不皂化物，后用 30 mL 正己烷洗脱并操作流速，群集洗脱液。洗脱液在 65 ℃ 旋转蒸发器蒸干后复溶于 5 mL 正己烷，转移到 15 mL玻璃离心小管中，氮吹后退出 100 μL 硅烷化试剂( 99∶ 1 BSTFA － TMCS 以及等体积无水嘧啶) 衍生试剂，室温部署 15 min，退出 1 500 μL 正己烷稀释，过 0． 22 μm 有机滤膜，进样，按 1． 2． 2 条件妨碍 GC － MS 合成，峰面积带入尺度曲线方程中合计各三萜类化合物的含量。

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